如何正確使用ELISA板進行實驗?

　　以下是ELISA板正確使用的實驗指南，本生結合關鍵操作要點和常見問題解決方案：

　　一、實驗前準備

　　板選擇與處理?

　　優(yōu)先選用聚苯乙烯材質96孔板(吸附性能均衡)，新板需用去離子水沖洗去除雜質?

　　包前用碳酸鹽緩沖液(pH 9.6)平衡，避免溫差導致板變形

　　試劑配制?

　　標準品需現配現用，凍存樣本避免反復凍融(建議分裝保存)

　　封閉液推薦5% BSA-PBST(含0.05%吐溫20)，37℃預溫30分鐘

　　二、核心操作步驟

　　包被與封閉?

　　抗原/抗體包被濃度1-10 μg/mL，100μL/孔，4℃過夜或37℃ 2小時?

　　封閉液需覆蓋孔底，37℃孵育1小時，拍干時避免殘留液體

　　加樣與孵育?

　　樣本與標準品同步加樣，避免邊緣效應(邊緣孔可加PBS緩沖)

　　37℃孵育時用保鮮膜封板，每10分鐘輕震混勻一次

　　三、關鍵質控點

　　洗滌規(guī)范?

　　手工洗板需拍干后立即加洗滌液，機器洗板需檢查針頭通暢性

　　洗滌次數3-5次，最后一次拍干后30秒內加下一試劑

　　顯色控制?

　　TMB避光孵育時間需預實驗確定(通常10-20分鐘)

　　終止液加入后15分鐘內讀數，雙波長檢測(450/630nm)

　　四、常見問題處理

　　高背景?：增加洗滌次數至5次，或更換封閉液為5%脫脂奶粉?

　　板間差異?：同一實驗使用同一批次板，加樣時使用多通道移液器

　　注：具體參數需根據試劑盒說明書調整，建議每板設置陰陽性對照及標準曲線(R2>0.99)。

　　注：以上僅供參考，不作為實際數據，實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術老師。

　　天津本生一直視質量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經營中始終秉承：遵紀守法，嚴于律己，寬仁以待，敢于承擔的企業(yè)精神作為標準，以過硬的質量和優(yōu)良的服務來維護和拓展市場，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標，本生，您信任的合作伙伴!