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    牛白細(xì)胞介素10(IL-10)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說明書
    發(fā)布時間:2025/6/5瀏覽:266次
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      以下是天津本生牛白細(xì)胞介素10(IL-10)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)說明書核心內(nèi)容整理,綜合多個來源信息:

      檢測原理?

      采用雙抗體夾心法(ELISA):

      預(yù)包被抗牛IL-10抗體的微孔板捕獲樣本中的目標(biāo)蛋白。

      加入HRP標(biāo)記的檢測抗體形成復(fù)合物,TMB顯色(藍(lán)色→黃色)。

      通過450nm波長測定OD值,計(jì)算濃度。

      樣本處理要求?

      類型?:血清、血漿、細(xì)胞上清液、組織勻漿。

      處理方法?:

      血清/血漿?:3000轉(zhuǎn)離心10-30分鐘分離,避免溶血或高脂血。

      組織勻漿?:生理鹽水搗碎后離心取上清。

      保存?:分裝后-20℃凍存,避免反復(fù)凍融。

      試劑盒組成?

      組分 規(guī)格/數(shù)量 備注

      預(yù)包被微孔板 12孔×8條 可拆卸

      標(biāo)準(zhǔn)品 0.5ml(濃度梯度) 需稀釋

      HRP標(biāo)記抗體 6ml 避光保存

      TMB顯色液 A液+B液各6ml 現(xiàn)配現(xiàn)用

      終止液 6ml 酸性溶液

      濃縮洗滌液 20ml(30倍稀釋) 使用前稀釋

      操作步驟?

      平衡試劑?:室溫放置15-30分鐘。

      標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?:按說明書梯度稀釋(如40ng/L→20ng/L→10ng/L)。

      加樣與孵育?:

      加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本(100μl/孔),37℃孵育60分鐘。

      洗滌?:手工或自動洗板5次。

      顯色與終止?:

      加入TMB避光反應(yīng)15分鐘,終止后立即檢測OD值。

      注意事項(xiàng)?

      靈敏度與范圍?:典型檢測范圍15.6-1000 pg/mL,靈敏度因品牌差異。

      交叉反應(yīng)?:與牛IL-10類似物無顯著交叉。

      保存條件?:未開封試劑盒2-8℃保存,開封后板條需密封防潮。

      禁止檢測?:含NaN3的樣本(抑制HRP活性)。

      數(shù)據(jù)計(jì)算?

      以標(biāo)準(zhǔn)品OD值繪制曲線,擬合方程計(jì)算樣本濃度。

      注:以上資料僅供參考,如需完整說明書,請參考試劑盒附帶文檔或聯(lián)系供應(yīng)商。

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