兔子凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒實驗使用說明書

　　以下是兔子凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒的實驗使用說明書，綜合相關產品技術參數和操作規范整理：

　　BS-4221 兔子凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒 天津本生

　　一、試劑盒組成

　　預包被板?：96孔或48孔(抗兔FⅡ抗體包被)

　　標準品?：6-7管凍干粉(濃度梯度：0.5-16 μmol/L)

　　檢測抗體?：HRP標記的抗兔FⅡ多克隆抗體

　　樣本稀釋液?、20×洗滌緩沖液

　　顯色底物?(TMB A/B)、終止液(2M硫酸)

　　封板膜?、說明書等耗材

　　二、樣本處理要求

　　血清/血漿?：

　　全血采集后室溫靜置1-2小時，4℃離心(3000 rpm，20分鐘)取上清

　　避免使用溶血或高脂血樣本，短期保存于-20℃，長期需-80℃凍存

　　組織勻漿?：

　　按1:9(重量:體積)加入PBS勻漿，離心后取上清檢測

　　三、實驗步驟(雙抗體夾心法)

　　標準品復溶?：每管加200 μL稀釋液溶解，梯度稀釋為1/2~1/64濃度系列

　　加樣孵育?：

　　標準孔：直接加50 μL標準品

　　樣本孔：先加10 μL樣本，再加40 μL稀釋液(5倍稀釋)

　　37℃孵育60分鐘，洗板5次(手工沖洗或洗板機)

　　顯色與檢測?：

　　每孔加TMB底物50 μL，避光顯色15分鐘

　　加終止液后15分鐘內測OD450值

　　四、注意事項

　　試劑保存?：未開封試劑盒2-8℃保存，復溶后標準品需分裝-20℃凍存

　　質量控制?：

　　板內變異系數<10%，板間變異系數<15%

　　建議標準曲線R2≥0.990

　　干擾規避?：避免使用NaN3防腐劑(抑制HRP活性)

　　五、結果計算

　　以標準品濃度為橫坐標、OD值為縱坐標繪制曲線，通過四參數擬合方程計算樣本濃度。若樣本OD值超出標準曲線范圍，需適當稀釋后重測

　　如需具體產品的完整說明書或代測服務，可聯系供應商獲取(部分廠商提供免費代測和技術支持)。

　　注：以上資料僅供參考，具體請咨詢技術老師或品牌供應商。

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