人白細胞分化抗原30(CD30)ELISA試劑盒實驗使用說明書

　　BS-0017人白細胞分化抗原30(CD30)ELISA試劑盒

　　以下是人白細胞分化抗原30(CD30) ELISA試劑盒的規范使用說明，本生整合了多個品牌試劑盒的通用操作流程與注意事項：

　　一、試劑盒組成?

　　核心組分?

　　預包被抗CD30抗體的96孔酶標板(可拆分為48T/96T規格)?

　　凍干CD30標準品(濃度范圍：2.5–40 ng/L，需用標準品稀釋液復溶)?

　　生物素標記的抗CD30抗體(即用型)?

　　HRP標記的親和素(即用型)?

　　TMB底物液(A液與B液需混合使用)及終止液(2N H?SO?)?

　　輔助試劑?

　　洗滌緩沖液(20×濃縮液，需按1:20稀釋)?

　　樣本稀釋液(用于血清/血漿預處理)?

　　二、樣本處理要求?

　　采集與保存?

　　血清/血漿?：全血靜置10-20分鐘后離心(2000–3000 rpm，20分鐘)，取上清分裝于-20℃保存，避免反復凍融?。

　　細胞上清/組織勻漿?：離心去除顆粒物后檢測，高濃度樣本需稀釋至標準曲線范圍內?。

　　注意事項?

　　避免使用含NaN?的保存液，以免HRP活性?。

　　細菌污染的樣本可能導致假陽性，需嚴格無菌操作?。

　　三、實驗步驟?

　　標準品制備?

　　凍干標準品按說明書復溶(如0.5mL樣本稀釋液溶解)，梯度稀釋至5個濃度點(如40、20、10、5、2.5 ng/L)?。

　　加樣與孵育?

　　每孔加入100μL標準品/樣本，37℃孵育90分鐘?。

　　洗滌3次后，加入100μL生物素標記抗體，37℃孵育60分鐘?。

　　再次洗滌，加入100μL HRP-親和素，37℃孵育30分鐘?。

　　顯色與終止?

　　每孔加入100μL TMB底物，避光顯色15–20分鐘(顏色由藍轉黃)?。

　　加入50μL終止液，顏色轉為黃色，10分鐘內測定OD450nm值?。

　　四、結果計算?

　　以標準品濃度為橫坐標、OD值為縱坐標繪制標準曲線，樣本濃度通過曲線方程計算?。

　　檢測靈敏度通常≤1.0 ng/L，批內CV≤15%?。

　　五、常見問題處理?

　　問題? ?可能原因? ?解決方案?

　　顯色過弱 孵育時間不足/抗體失活 延長孵育時間或更換新鮮試劑?

　　背景偏高 洗滌不充分/底物污染 增加洗滌次數或更換底物?

　　標準曲線異常 標準品稀釋錯誤 嚴格按梯度稀釋并短暫離心混勻?

　　六、注意事項?

　　試劑盒僅限科研使用，不可用于臨床診斷?。

　　操作時避免使用金屬器材接觸酶標板，防止靜電干擾?。

　　未用完的酶標板需密封保存于2–8℃，避免受潮?。

　　注：以上資料僅供參考，具體請咨詢技術老師或品牌供應商。

　　人白細胞分化抗原30(CD30)ELISA試劑盒 本生一直視質量控制為企業的生命，追求企業競爭力的不斷提升。公司在經營中始終秉承：遵紀守法，嚴于律己，寬仁以待，敢于承擔的企業精神作為標準，以過硬的質量和優良的服務來維護和拓展市場，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作，共創美好的未來。