大鼠白介素27(IL-27)ELISA檢測試劑盒技術說明書

　　BS-2900大鼠白介素27(IL-27)ELISA試劑盒

　　一、產品概述

　　本試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯免疫吸附技術，專用于定量檢測大鼠血清、血漿、組織勻漿及細胞培養上清中的白介素27(IL-27)。IL-27是由EBI3和p28亞基組成的異源二聚體，在免疫調節中發揮重要作用?。

　　二、檢測原理

　　固相包被?：抗大鼠IL-27單抗預包被于微孔板。

　　復合物形成?：樣本中IL-27與包被抗體結合，加入生物素標記的檢測抗體形成夾心結構。

　　酶聯反應?：加入HRP標記的鏈霉親和素，與生物素結合。

　　顯色測定?：加入TMB底物顯色，終止液終止反應后，在450nm波長下測定OD值，濃度與OD值呈正相關?。

　　三、試劑盒組分

　　組分 規格 儲存條件

　　預包被微孔板 96孔/48孔 2-8℃

　　標準品(凍干粉) 6個濃度梯度 -20℃

　　生物素標記抗體 100×濃縮液 -20℃

　　HRP標記鏈霉親和素 100×濃縮液 -20℃

　　TMB顯色液 避光保存 2-8℃

　　終止液(2M硫酸) 室溫 避光

　　濃縮洗滌液(20×) 需稀釋 室溫

　　樣本稀釋液 即用型 2-8℃

　　四、樣本要求

　　樣本類型?：

　　血清/血漿：EDTA抗凝，離心后取上清。

　　組織勻漿：生理鹽水勻漿，離心取上清。

　　細胞上清：離心去除細胞碎片。

　　保存條件?：

　　短期(≤7天)：2-8℃。

　　長期(>7天)：-20℃或-70℃，避免反復凍融?。

　　五、實驗步驟

　　1. 標準品配制

　　用樣本稀釋液復溶凍干標準品，稀釋至6個濃度梯度(如1000、500、250、125、62.5、0 pg/mL)。

　　2. 加樣與孵育

　　每孔加入100μL標準品或樣本，37℃孵育90分鐘。

　　洗滌5次，每次300μL洗滌液，拍干。

　　3. 抗體反應

　　加入100μL生物素標記抗體，37℃孵育60分鐘。

　　洗滌后加入100μL HRP標記物，37℃孵育30分鐘。

　　4. 顯色與終止

　　加入90μL TMB底物，避光孵育15-20分鐘。

　　加入50μL終止液終止反應?。

　　5. 檢測

　　酶標儀450nm波長測定OD值。

　　六、結果計算

　　以標準品濃度為橫坐標(X)，OD值為縱坐標(Y)，繪制標準曲線。

　　樣本濃度根據OD值從標準曲線中讀取，若超出范圍需稀釋后復測?。

　　七、技術參數

　　參數 指標

　　檢測范圍 15.6-1000 pg/mL

　　靈敏度 ≤5.7 pg/mL

　　精密度(批內/批間) CV <10%/CV <12%

　　回收率 血清91%、EDTA血漿93%、肝素血漿94%

　　八、注意事項

　　試劑保存?：

　　未開封試劑盒：-20℃保存1年。

　　開封后：4℃保存1周，長期需分裝-20℃。

　　操作規范?：

　　避免溶血、脂血樣本。

　　洗滌需凈，拍干后立即下一步。

　　終止液為酸性，需防護皮膚和眼睛?。

　　質量控制?：

　　每批實驗設空白孔和標準曲線，R2需>0.95。

　　樣本稀釋后需重新檢測。

　　九、常見問題

　　OD值過高?：樣本濃度過高，需稀釋。

　　顯色不均?：檢查洗滌或加樣準確性。

　　線性差?：重新配制標準品或更換試劑?。

　　十、適用范圍

　　本試劑盒僅供科研使用，不可用于臨床診斷?。

　　注：以上僅供參考，不作為實際數據，實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術老師。 Elisa試劑盒

　　大鼠白介素27(IL-27)ELISA試劑盒實驗使用說明書 本生一直視質量控制為企業的生命，追求企業競爭力的不斷提升。公司在經營中始終秉承：遵紀守法，嚴于律己，寬仁以待，敢于承擔的企業精神作為標準，以過硬的質量和優良的服務來維護和拓展市場，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發展目標，本生，您信任的合作伙伴!