小鼠肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶(CPT)ELISA檢測試劑盒技術(shù)說明書

　　BS-9438小鼠肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶(CPT)ELISA試劑盒

　　一、產(chǎn)品概述

　　本試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)原理，專用于體外定量檢測小鼠血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶(CPT-1)的含量。CPT-1是線粒體內(nèi)膜的關(guān)鍵酰基轉(zhuǎn)移酶，催化脂肪酸轉(zhuǎn)運過程，在能量代謝中起核心作用?。

　　二、技術(shù)參數(shù)

　　檢測范圍?：0.156-10 ng/mL(以CPT-1A亞型為例)?

　　靈敏度?：低檢測限≤0.1 ng/mL

　　特異性?：與小鼠CPT-1抗體特異性結(jié)合，無交叉反應(yīng)

　　重復(fù)性?：批內(nèi)變異系數(shù)(CV)<10%，批間CV<15%

　　有效期?：6個月(2-8℃避光保存)?

　　三、試劑盒組成

　　組分 48T規(guī)格 96T規(guī)格 保存條件

　　預(yù)包被酶標(biāo)板 8×6條 8×12條 4℃

　　標(biāo)準(zhǔn)品 1支(凍干) 1支(凍干) -20℃

　　生物素化檢測抗體 60 μL 120 μL -20℃

　　顯色底物(TMB) 3 mL 6 mL 4℃避光

　　終止液 6 mL 12 mL 室溫

　　20×濃縮洗滌液 30 mL 60 mL 室溫

　　四、樣本處理規(guī)范

　　血清/血漿采集?：

　　使用無熱原、無內(nèi)毒素試管，避免溶血。

　　3000×g離心10分鐘(血清)或30分鐘(血漿)，取上清。

　　短期保存(2-8℃≤48小時)，長期需分裝-20℃/-80℃凍存，避免反復(fù)凍融?。

　　組織勻漿制備?：

　　稱取0.1g組織或500萬細(xì)胞，加入1mL裂解液。

　　冰浴勻漿后，600×g離心5分鐘棄沉淀，上清液11000×g離心10分鐘取上清?。

　　五、操作流程

　　標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?：

　　取7支EP管，標(biāo)注1/2至1/64梯度，每管加入200μL標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液。

　　首管加入200μL原液混勻，依次等比稀釋至1/64濃度?。

　　酶標(biāo)板操作?：

　　每孔加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品/樣本，37℃孵育90分鐘。

　　洗滌3次后，加入100μL生物素化抗體，37℃孵育60分鐘。

　　加入100μL辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記鏈霉親和素，37℃孵育30分鐘。

　　顯色反應(yīng)：每孔加入90μL TMB底物，避光孵育15分鐘，終止液終止反應(yīng)。

　　讀數(shù)分析?：

　　酶標(biāo)儀450nm波長測定OD值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣本濃度。

　　六、注意事項

　　質(zhì)量控制?：每批次實驗需設(shè)置空白孔、標(biāo)準(zhǔn)曲線孔及復(fù)孔。

　　干擾因素?：避免使用高脂/溶血樣本，洗滌需以減少背景噪聲。

　　安全防護(hù)?：終止液含liusuan，操作時佩戴防護(hù)裝備。

　　七、應(yīng)用領(lǐng)域

　　基礎(chǔ)研究?：解析小鼠脂肪酸代謝機(jī)制。

　　藥物開發(fā)?：評估代謝類藥物的療效。

　　疾病模型?：研究肥胖、糖尿病等代謝性疾病?。

　　本試劑盒僅供科研使用，不可用于臨床診斷。詳細(xì)操作請參閱隨附說明書。

　　注：以上僅供參考，不作為實際數(shù)據(jù)，實驗需嚴(yán)格遵循說明或咨詢技術(shù)老師。 Elisa試劑盒

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