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    小鼠硫酸轉移酶(SULT)ELISA檢測試劑盒技術說明書
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      小鼠(SULT)ELISA檢測試劑盒技術說明書

      BS-9421小鼠(SULT)ELISA試劑盒

      一、產品概述

      本試劑盒基于雙抗體夾心酶聯免疫吸附法(ELISA),專用于定量檢測小鼠血清、血漿、組織勻漿及相關液體樣本中硫酸轉移酶(SULT)的活性水平。?僅供科研使用?,不可用于臨床診斷。

      二、實驗原理

      雙抗體夾心法?:微孔板預包抗小鼠SULT捕獲抗體,樣本中SULT與其結合后,加入生物素標記的檢測抗體形成“抗體-抗原-抗體"復合物。

      酶聯顯色?:加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的鏈霉親和素,催化底物TMB顯色,顏色深淺與SULT濃度呈正相關。

      定量檢測?:酶標儀450nm波長測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣本濃度。

      三、試劑盒組成

      組分 規格(48孔/96孔) 保存條件

      酶標包被板 1×48/1×96 2–8℃

      標準品(80U/L) 0.3ml×6管 2–8℃

      酶標試劑(HRP標記) 5ml/10ml 2–8℃

      顯色劑A液 3ml/6ml 2–8℃

      顯色劑B液 3ml/6ml 2–8℃

      終止液 3ml/6ml 2–8℃

      濃縮洗滌液(20×) 15ml/25ml 2–8℃

      封板膜、密封袋 2片/1個 室溫

      四、樣本處理

      血清/血漿?:

      室溫靜置10–20分鐘,2000–3000轉/分離心20分鐘,取上清液。

      避免反復凍融,建議分裝后-80℃保存。

      組織勻漿?:

      組織加入生理鹽水搗碎,1000×g離心33分鐘,取上清液。

      細胞上清液?:

      1000×g離心32分鐘去除顆粒,取澄清液。

      五、實驗步驟

      標準品稀釋?:用標準品稀釋液將標準品梯度稀釋為6個濃度點(80–0 U/L)。

      加樣與溫育?:

      每孔加入100μL標準品/樣本(建議復孔)。

      37℃避光溫育90分鐘。

      洗滌?:棄去孔內液體,用洗滌液浸泡30秒后拍干,重復3次。

      顯色與終止?:

      每孔加入顯色劑A/B液各50μL,37℃避光顯色15分鐘。

      加入終止液50μL終止反應。

      檢測?:酶標儀450nm波長測定OD值,通過標準曲線計算樣本濃度。

      六、注意事項

      試劑平衡?:冷藏試劑需室溫平衡15–30分鐘后再使用。

      操作規范?:

      避免氣泡產生,加樣時貼壁緩慢加入。

      濃縮洗滌液如有結晶,可水浴加熱助溶。

      安全防護?:

      終止液含強酸,需佩戴手套操作。

      實驗區域禁止飲食、吸煙。

      質量控制?:

      每板需設空白孔和標準曲線孔。

      板內/板間變異系數應<10%。

      七、結果計算

      以標準品濃度(U/L)為橫坐標,OD值為縱坐標繪制四參數擬合曲線。

      樣本濃度=曲線方程OD值代入結果×稀釋倍數。

      八、保存與有效期

      未開封試劑盒:2–8℃保存6個月。

      已開封酶標板:密封袋裝2–8℃保存≤1個月。

      注:以上僅供參考,不作為實際數據,實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術老師。

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