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    人白介素17(IL-17)ELISA檢測試劑盒技術說明書
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      人白介素17(IL-17)ELISA檢測試劑盒技術說明書

      BS-9770人白介素17(IL-17)ELISA試劑盒

      一、產品概述

      本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附測定法(ELISA),專用于定量檢測人血清、血漿及相關生物液體樣本中白細胞介素17(IL-17)的含量。IL-17是一種由Th17細胞分泌的促炎細胞因子,在自身免疫疾病和炎癥反應中起關鍵作用。

      二、檢測原理

      雙抗體夾心技術:

      預包被抗人IL-17單抗的微孔板捕獲樣本中的IL-17。

      加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的二抗,形成“抗體-抗原-酶標抗體"復合物。

      通過TMB顯色反應,顏色深淺與IL-17濃度呈正相關,450nm波長下測定吸光度(OD值)。

      三、試劑盒組成

      組分規格(96孔配置)保存條件

      酶標包被板1×96孔2–8℃

      標準品(270ng/L)0.5ml×1瓶2–8℃(長期-20℃)

      標準品稀釋液1.5ml×1瓶2–8℃

      酶標試劑6ml×1瓶2–8℃

      樣品稀釋液6ml×1瓶2–8℃

      顯色劑A/B液各6ml×1瓶2–8℃避光

      終止液6ml×1瓶2–8℃

      濃縮洗滌液20ml×30倍×1瓶2–8℃

      說明書1份室溫

      四、樣本處理要求

      血清/血漿:

      室溫靜置10–20分鐘,2000–3000轉/分離心20分鐘,取上清液

      避免反復凍融,若出現沉淀需再次離心

      細胞培養上清:

      離心后取上清,檢測分泌性成分時需無菌操作

      尿液/組織勻漿:

      尿液離心后取上清;組織樣本需勻漿后離心分裝

      五、操作步驟

      標準品稀釋:

      梯度稀釋標準品(如270ng/L至1ng/L),每孔加樣50μL

      樣本加樣:

      樣本稀釋后加10μL至微孔,加樣量40μL(總稀釋度5倍)

      溫育:

      37℃避光反應30分鐘,封板膜覆蓋

      洗滌:

      洗滌液浸泡1分鐘/次,重復3–5次,拍干孔內液體。

      顯色與終止:

      加入TMB顯色液避光反應15–20分鐘,終止液終止反應。

      讀數:

      酶標儀450nm波長測定OD值,通過標準曲線計算濃度。

      六、性能指標

      靈敏度:低至0.1pg/mL(小鼠IL-17參考值) ,人IL-17約3.8pg/mL。

      檢測范圍:7.8–500pg/mL(人IL-17C參考值) ,或31.3–2000pg/mL(人IL-17)。

      特異性:與IL-17家族其他成員(如IL-17B、IL-17F)無交叉反應。

      重復性:板內/板間變異系數<10%

      七、注意事項

      保存條件:

      試劑盒2–8℃保存,標準品長期存放需-20℃

      有效期:

      6個月(4℃),12個月(-20℃)。

      實驗環境:

      避免強光照射,顯色液需37℃預平衡。

      八、參考文獻

      雙抗體夾心法原理及操作規范

      樣本處理與保存指南

      試劑盒性能驗證數據

      注:以上僅供參考,不作為實際數據,實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術老師。

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